Класс Mollicutes содержит пять родов: Mycoplasma, Ureaplasma, Acholeplasma, Asteroplasma, Anaeroplasma. Отсутствие ригидной клеточной стенки и дало название классу — Mollicutes («mollis» — мягкий, «cutes» — кожа). Человек является хозяином, как минимум, 16 видов микоплазм: наибольшее клиническое значение имеют 5 видов микоплазм, из которых 4 вида — M.genitalium, M.hominis, Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum, которые проявляют тропность к эпителию урогенитального тракта и играют роль в развитии воспалительных процессов.
Большинство изученных видов относится к роду Mycoplasma. Микоплазмы широко распространены в природе, чрезвычайно плеоморфны и могут принимать форму как типичных округлых клеток, так и филаментоподобных структур («mycos» — гриб и «plasma» — форма), где одна цитоплазма объединяет несколько геномов. Отличительными чертами микоплазм являются:
- малые размеры жизнеспособных частиц, близкие к размерам крупных вирусов;
- отсутствие ригидной клеточной стенки;
- способность расти на бесклеточных питательных средах;
- полиморфизм клеток;
- на плотных средах колонии микоплазм имеют вид «яичницы глазуньи» (вросший в среду центр и ажурная периферия), в организме прикрепляются к мембране клетки (мембранные паразиты);
- рост микоплазм ингибируют тетрациклины, макролиды; к β-лактамным антибиотикам, ингибирующим синтез клеточной стенки, микоплазмы резистентны.
Ureaplasma urealyticum и parvum — это мелкие бактерии, не имеющие клеточной стенки, размножающиеся простым делением и относящиеся к роду Ureaplasma, наиболее распространенные представители данного рода. Широкое распространение некоторых представителей микоплазм среди здоровых женщин разного возраста (частота колонизации M.hominis, по данным разных авторов, варьирует от 10 до 50%, а Ureaplasma spp. — от 11 до 80%) позволило большинству исследователей рассматривать их в качестве комменсалов в составе нормального вагинального биоценоза, способных при определенных условиях вызывать: уретрит, цервицит, вагинит, спонтанные аборты и преждевременные роды, послеабортные и послеродовые осложнения, рождение детей с низкой массой тела, нарушение микробиоценоза влагалища, ВЗОМТ, бесплодие. Во время беременности частота обнаружения микоплазм увеличивается в 1,5–2 раза, и зависит, вероятно, либо от гормонального фона, либо от изменений других условий среды их обитания, связанных с физиологическими процессами в организме беременной, в частности, от состояния иммунологической реактивности макроорганизма.
Факторы, провоцирующие развитие микоплазменной инфекции во время беременности:
- гиперэстрогения — вызывает усиление размножения микоплазм;
- эстрадиол усиливает чувствительность половой системы к U. urealyticum, M. hominis, M. fermentans;
- иммуносупрессивный эффект беременности.
Колонизация новорожденных генитальными микоплазмами происходит при прохождении через родовые пути, в первый год жизни количество микроорганизмов уменьшается. В пубертатном возрасте генитальные микоплазмы у девочек выявляются в 5–22% случаев, у мальчиков — гораздо реже. Существует мнение, что активная колонизация микоплазмами урогенитального тракта происходит только с началом половой жизни, на фоне гормональных изменений вследствие повышения влияния эстрогенов и прогестерона.
Частота обнаружения микоплазм у мужчин без клинических проявлений более низкая, чем у женщин. Выявление U. urealyticum и M. hominis в уретре при негонококковых уретритах является на сегодняшний день спорным для постановки этиологического диагноза — считается, что только клинически значимые количества данных возбудителей могут рассматриваться как причина уретрита.
Таким образом, M. hominis, U. urealyticum и Ureaplasma parvum признано большинством специалистов условно-патогенными возбудителями, что определяет принципы лабораторной диагностики, контроля эффективности лечения и критерии выздоровления.
Относительно M. genitalium существует совершенно другая и четкая позиция — это представитель безусловных патогенов, относится к инфекциям, передающимся половым путем, и обязательна к исключению при воспалительных заболеваниях урогенитального тракта. Несмотря на то, что M. genitalium была описана относительно недавно (в 1981 г.), к настоящему времени уже накоплено достаточное количество данных, доказывающих роль этого микроорганизма в развитии инфекций органов репродукции у мужчин и женщин. Показано, что M. genitalium встречается у 13,6% мужчин, отмечающих симптомы уретрита (в 88% случаев встречается как единственный возбудитель), а у женщин с симптомами уретрита и/или цервицита M. genitalium обнаруживается в 12,3% случаев (в 93,7% случаев встречается как единственный возбудитель). M. genitalium — вторая по частоте после Chl. trachomatis причина уретритов у мужчин, а при цервицитах в обследованной группе женщин M. genitalium находилась на первом месте.
Лабораторная диагностика
Лабораторная диагностика микоплазменной инфекции базируется на особенностях различных представителей данного класса возбудителей.
Для M.hominis, Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum, как представителей условно-патогенных возбудителей, предлагаются:
- прямые методы выявления возбудителей: культуральный метод, позволяющий определить не только наличие возбудителя, но и оценить его количество и определить чувствительность к антибиотикам; метод ПЦР анализа в качественном и количественном формате проведения: для данных возбудителей наиболее эффективным методом является количественный формат оценки;
- непрямые методы выявления возбудителей — серологические маркеры (определение антител к возбудителю классов IgA, IgM и IgG).
На этапе определения этиологического диагноза клинических проявлений наиболее оптимальным является проведение прямых методов (культуральный или ПЦР в количественном формате) диагностики для возможности не только выявить наличие возбудителя, но и оценить его количество. Кроме того, на этапе диагностики необходимо обязательное исключение представителей истинных патогенов: N. gonorrhoeae, Chl. trachomatis, M. genitalium, T. vaginalis. В ходе контроля эффективности лечения данные методы позволят оценить не только элиминацию, но и снижение количества возбудителя ниже клинически значимых уровней, что будет свидетельствовать об эффективности проводимого лечения.
Аналитическая чувствительность ПЦР диагностики выше таковой для культуральных методов, а диагностическая чувствительность составляет 95–100%. Важной особенностью ПЦР для выявления микоплазм урогенитального тракта является возможность качественного и количественного формата анализа, видовой дифференцировки Ureaplasma. Качественный формат ПЦР может быть использован в качестве скрининга, количественный — для установления этиологического диагноза и контроля эффективности лечения.
Бактериологический метод признан «золотым стандартом» в диагностике инфекционных причин заболеваний благодаря возможности выявления возбудителя, оценки степени роста, идентификации и определения чувствительности к антибиотикам. Большинством исследователей признано, что только клинически значимые количества данных возбудителей (104 КОЕ/мл и более) дают основание для установления этиологического диагноза и старта лечения. Ограничением метода для диагностики представителей микоплазм является невозможность провести видовую идентификацию Ureaplasma.
Серологические маркеры имеют ограниченное значение для установления диагноза в силу особенностей возбудителей — отсутствие собственной клеточной стенки, использование клетки хозяина, что приводит к низким иммуногенным свойствам микоплазм и возможности получения ложноотрицательных результатов, существование большого количества серотипов к ложноположительным результатам. Наиболее значимым данное тестирование признано в случае хронического течения (восходящей инфекции с вовлечением матки, труб, яичников), генерализации процесса (послеродовая бактериемия, сепсис, лихорадка послеабортная, послеродовая). Этиологический диагноз в данном случае данных возбудителей ставится на основании не просто обнаружения иммуноглобулинов, а на наличии динамики нарастания не менее чем в 4 раза в парной сыворотке, т. к. обнаружение антител свидетельствует о наличии иммуннного ответа, возникшего в ходе текущей или имевшей место в прошлом экспозиции к M. hominis, Ureaplasma urealyticum и Ureaplasma parvum. Также антитела могут обнаруживаться у людей без клинических проявлений инфекции. Диагностическая чувствительность серологических маркеров составляет 62–75%.
Для диагностики инфекции, вызванной M. genitalium, рутинные лабораторные методы не подходят, поскольку маленький размер возбудителя (0,3 мкм в диаметре) служит препятствием для проведения микроскопического исследования. M. genitalium является труднокультивируемым микроорганизмом, что делает затруднительным проведение бактериологического посева. Показаны перекрестные реакции между Mycoplasma genitalium и Mycoplasma pneumoniae, что затрудняет серологическую диагностику этих микроорганизмов. Таким образом, в настоящее время методы амплификации нуклеиновых кислот (ПЦР анализ) — единственные доступные методы для диагностики инфекции, вызванной M. genitalium. Учитывая, что данный возбудитель признан безусловным патогеном, эффективным методом ПЦР диагностики является качественный формат.
- Соблюдение общих правил подготовки к бактериологическим исследованиям:
— сбор материала проводится до начала лечения антибактериальными, иммунобиологическими, противогрибковыми препаратами (общего и местного значения);
— при контроле эффективности лечения (после окончания курса лечения) исследование проводится через 14 дней.
- В течение трех часов воздержаться от мочеиспускания.
- В течение трех суток воздерживаться от половых контактов.
- Женщинам в течение трех дней исключить спринцевания и постановку вагинальных свечей, мазей, тампонов, материал нельзя сдавать во время менструации (только через три дня после ее окончания).
Маркер наличия Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp. (urealyticum/pаrvum) в клиническом материале с оценкой количества возбудителя и определением чувствительности к антибиотикам
- Исключение M. hominis, Ureaplasma spp. как причины клиники негонококковых уретритов, простатитов, орхоэпидидимитов (у мужчин), кольпитов, эндоцервицитов, вульвовагинитов (у женщин), циститов, болезни Рейтера;
- исключение M. hominis, Ureaplasma spp. как сопутствующей инфекции при наличии ИППП;
- при бесплодии, ВЗОМТ, осложнениях беременности (спонтанные аборты, преждевременные роды);
- контроль эффективности лечения (оптимально -- через 3 недели после окончания)
При оценке результатов тестирования в случае выявления возбудителя принимается во внимание количество, отражающее степень роста
|
|
Обнаружена | Не обнаружена |
---|---|
|
|
срок получения результата - 6 дней.